生物有機肥料中糞大腸菌群數的國標測定方法
2021-03-31 10:28:41 來源：【朋檢農業科技】
糞大腸菌群數的測定
（1）樣品稀釋
在無菌操作下稱取樣品10g或吸取樣品10ml，加入到帶玻璃珠的90ml無菌水中，置于搖床上200r/min充分震蕩30min，即成10-1稀釋液。
（2）乳糖發酵試驗
選取三個連續適宜稀釋液，分別吸取不同稀釋液1ml加入到乳糖膽鹽發酵管內，每一稀釋度接種3支發酵管，置44.5攝氏度恒溫水浴或隔水式培養箱內，培養24小時。如果所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣不產酸，則為糞大腸菌群陰性，如果有產酸產氣或只有產酸的發酵管，則按分離培養步驟進行。
（3）分離培養
從產酸產氣或只產酸的發酵管中分別挑取發酵液在伊紅美藍瓊脂平板上劃線，置于36攝氏度條件下培養18-24小時。
（4）證實試驗
從（3）中分離平板上挑取可疑菌落，進行革蘭氏染色，染色反應陽性為糞大腸菌群陰性；如果為革蘭氏陰性無芽孢桿菌則挑取同樣菌落接種在乳糖發酵管中，置44.5攝氏度條件下培養24小時。觀察產氣情況，不產氣為糞大腸菌群陰性，產氣為糞大腸菌群陽性。
（5）結果
證實試驗為糞大腸菌群陽性的，根據糞大腸菌群陽性發酵管數，查MPN檢索表，得出每克肥料樣品中的糞大腸菌群數。
